GB/T-16886.11 医疗器械生物学评价 医疗器械全身毒性试验

飞凡检测可跟据GB/T-16886.11对医疗器械生物学评价全身毒性进行测定。全身毒性是医疗器械使用中的一种潜在的不良作用，可由于器械或材料可沥滤物的吸收、分布和代谢到达不与之直接接触的人体部位而产生一般毒性作用以及器官和器官全身作用。 GB/T16886的本部分涉及一般全身毒性评价，不包括特异性靶器官或器官全身毒性，虽然毒性物质的全身性吸收和分布作用可导致这些作用。由于医疗器械及其材料和应用范围种类繁多，本部分未进行详细说明。在设计全身毒性试验时要考虑到具体的方法学，适当的研究设计必须与器械材料的特性及其预期临床应用相适应。本部分还包括遵守良好实验室质量管理规范和试验报告等方面内容。毒理学是一门发展中的科学，任何单项试验结果都不宜作为推断某种器械预期应用是否安全的唯一依据。一、范围GB/T16886的本部分规定了评价医疗器械材料导致潜在不良全身反应时的要求，并给出了试验步骤指南。二、规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的．凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件．凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ISO 10993-1 医疗器械生物学评价第1部分：风险管理过程中的评价与试脸（ Biological evaluation of medical deviccs-Part1 : evaluation and testing within a risk management process )ISO 10993-1 医疗器械生物学评价第2部分：动物福利要求（Biological evaluation of medical devices-Part2 : Animal welfare requircmcnts )ISO 10993-12 医疗器械生物学评价第12 部分：样品制备与参照样品（ Biological evaluation of medical devices-Part 12 : Sample preparation and reference materials )三、基本考虑1 、总则应按照ISO10993-1中给出的接触方式和接触周期来考虑选择器械的适宜试验。应在最终产品、最终产品和（或）材料的有代表性的组成样品上进行试验。试验样品应体现器械的正常制造和加工状态，若必需偏离，应记录在试验报告中并说明理由。出于识别危害的目的，可能需要对试验样品加大接触。在设计试验时要考虑的一些因素包括试验样品的物理和化学性能，如 pH 、稳定性、赫度、渗透压、缓冲力、溶解度和无菌性。当考虑动物试验时，宜分析并采用所有合理并实用的替代、减少及优化的替代方法，以满足ISO10993-2的规定．对于体内急性毒性试验，体外细胞毒性数据可用于估计起始剂量。2、动物种属选择对于选择医疗器械全身毒性试验具体动物种属没有juedui的耍求，但是，试验所用动物种属应经过科学论证并符合ISO10993-2的规定。对于医疗器械急性经口、静脉、皮肤和吸人研究，shouxuan小鼠或大鼠，皮肤和植人研究选择家兔。可能还耍考虑将非啮齿类动物用于试验，并对指导研究所用动物种属数量或选择的多种因素进行确认。在进行不同时间周期的全身毒性系列研究时，如急性、亚急性、亚慢性、和（或）慢性全身毒性研究，shouxuan采用同一种动物种属和动物品系，这样可控制动物种属和品系间的变异性，以利于对研究周期进行完全相关性评价。如使用多种动物种属或品系，对其选择理由应形成文件。3、动物状况一般情况下，宜使用已知来源并符合规定微生物健康状况的健康、初成年的饲育动物。在研究的开始阶段，同一性别的动物体重差异应不超过平均值的±20%，如使用雌性动物，宜未育并无孕．对动物选择应进行论证。4、动物饲养与管理动物饲养与管理应符合有关动物管理规定。在处置之前以及规定的试验周期内，应使动物适应实验室条件。为了获得有效的试验结果，环境条件的控制以及适当的动物饲养技术是必要的。宜对已知产生或影响毒性的饲料成分和垫料进行适当鉴别，并应考虑对试验结果的潜在影响。5、剂量组大小和数目5．1、剂且组大小全身毒性试验的jingque度在很大程度上取决于每一剂量水平所采用的动物数量。必需的试验jingque程度，或者说必需的每剂量组动物数量要根据研究的目的来确定。剂量组宜根据试验周期而增加动物数量，这样在试验终结时侮组能有足够的动物进行有效的生物学评价。但是，宜采用最少的动物来获取有效结果（见ISO10993-2）。5．2、 剂量组数目采用一种适宜的试验样品剂量进行单剂量组试验可判定是否存在毒性危害（即限度试验），但其他多剂量或剂量反应试验要求采用多个剂量组来判定毒性反应。如准备采用加大剂量，可增加剂量组。加大剂量宜考虑下列参数：——临床接触表面积的倍数；——接触周期的倍数；——浸提组分或具体化学物的倍数；——内多次接触。也可采用其他加大剂盘方法，所用方法应进行论证。5．3、对照品处置根据试验目的，宜结合试验样品状态、接触途径、阴性对照、介质对照、和（或）假处理对照来进行全身毒性试验。对照品应模拟试验样品制备和处里步骤。6 接触途径医疗器械或其可沥滤物可通过多种接触途径进人人体，试验接触途径应尽可能与器械的应用具有临床相关性，如应采用其他途径应进行论证7、样品制备ISO10993-12给出了样品制备和稳定性导则。8剂量8．1、试验样品给予宜设计接触步骤，以避免与试验材料毒性无直接关系的生理变化或动物福利问题。如不可能一次接触日剂盘体积或浓度，可采取不超过24h分次小剂量给予的方式。试验样品应在生理可接受温度下给与，一般常规采用室温或体温，如偏离应进行论证。胃肠外接触途径宜是生理相容性溶液，必要时可对样品进行过滤除去微粒并形成文件。反复接触全身毒性试验中，动物限制活动每天一般在4h-6h。动物限制活动的程度和时间宜符合科学目的的最低要求，而不是仅考虑试验动物福利要求。如偏离应进行论证。如必需限制动物活动，在接触试验样品之前宜使动物与固定器械相适应。8．2、 剂量体积当采用多剂量组时，可通过调整剂量浓度使试验体积差异降至最小，确保各剂量组剂觉体积恒定。宜避免经口途径给予大剂量体积，因为超出胃容盈会快速进人小肠，也可能会逆流返回食管。肌肉注射也有体积限制，要根据动物大小和肌肉部位来确定。快速静脉注射体积一般在约1min左右的时间内注射完毕。注射速度是一个重耍因素，推荐对啮齿动物大鼠注射速度应不超过2mL/min。注射较大剂量体积时可缓慢或分次注射，也可静脉输液。动物如果出现明显的临床症状，则应不再按照预定的速率，应停止给液或减慢给液速率。试验样品受溶解度或刺激方面的限制时可采用缓慢静脉注射速度。如有临床方面的指征可采取连续输液方式，根据所给物质以及标准液体治疗规范来确定给液体积和速度，2h内一次给液量小于循环血量的10%可作为一种参考。对于持续长时间输液来说，最低限度有效地限制动物活动也是要考虑的一个重耍因素。皮下给与试验样品吸收速率和程度与试验样品的组成有关。8 . 3、剂量频率宜根据临床相关性确定剂量频率。加严过程应详细描述并进行论证。在急性全身毒性试验中，动物宜在24h内一次或分次给予试验样品。在重复接触试验中，动物宜每日给与试验样品，试验期间每周7d给与。也可采用其他给与方式，但应进行论证。9 体重和饲料（水）消耗体重变化和饲料及水消耗的改变有可能是试验样品的作用，因此在给与试验样品前的短时间内（如一次接触或急性试验一般在24h内，重复接触试验在不超过7d内）应测量每只动物的体重，并在整个试验期间以及试验结束时定期测量动物体重。如要根据动物体重确定给与剂量，则应采用最新测量的体重。必要时长期重复接触试验应考虑测定饲料和水的消耗量。10、临床观察临床观察宜由受过培训的人员来进行，以保证报告的一致性。观察频率和间隔时间宜根据毒性反应的性质和严重程度、反应速度和恢复周期来确定，在试验的早期阶段尤其在急性试验中，可能需要增加观察次数。毒性迹象出现和消失的时间、持续时间和动物死亡时间都是很重要的，特别是出现延迟性不良临床症状或死亡的迹象。宜采取人道终点以避免使动物遭受不必要的痛苦。接触试验样品后基本临床观察应考虑预期作用的高峰期。应系统记录观察到的现象，并保留每只动物的观察记录。每天应至少一次采用实验室通用临床反应术语记录观察到的动物存活情况和明显的临床反应。长期重复接触试验每天应至少两次观察记录动物的发病率和死亡率，可考虑至少每周一次观察记录更大范围内的不良临床症状。11、临床病理学采用血液学和临床生化分析来研究组织、器官和其他系统的毒性反应。如有指征，应至少在预定的动物终点之前、或其中一个时期采集重复接触试验动物的血样来进行此类分析。有些情况下采血前可能需要动物禁食。如出于科学研究的需要，长期重复接触试验的最后一周可进行尿液检验，采用定时（如16h一24h）尿量采集方法。四、急性全身毒性1 、急性全身毒性提供根据预期临床途径进行的急性接触所产生的健康危害方面的基本信息。急性毒性试验可作为亚急性／亚慢性和其他试验确定剂量接触方式的初试步骤，并且可提供物质预期临床接触途径毒性作用模式方面的信息．本章中将涉及急性全身毒性试验中试验样品的给与方式、反应观察项目（如不良临床症状、体重变化、大体病理学发现）以及死亡。对出现严重及持续不适和痛苦的动物应立即实施安乐死，已知可导致显著疼痛或不适的腐蚀性或刺激性的材料宜报告，无需再进行试验。2、试验设计1、准备在试验前至少5d使健康初成年动物适应实验室环境，如不到5d则应进行论证。将动物随机分组。3、实验动物3 . 1、种属选择典型试验是采用啮齿类动物（大鼠、小鼠） ,上文给出了动物模型的要求（年龄、体重等）。如采用非啮齿类动物应对其使用进行科学论证。3. 2、设施与饲养条件实验室动物房的温度和相对湿度宜适合于动物种属，如小鼠需（22±3）℃、相对湿度（RH ) 30%-70％条件。典型的人工照明宜设置为12h开启、12h关闭。饲养方面，可采用标准商业实验室饲料，无限制性饮用水供应。适当时，动物宜按性别群养或单独饲养，群养时每一笼具应不多于5只动物。3. 3步骤在 24h内，动物接受试验样品的一次剂量或必要时接受多次剂量。记录观察到的毒性症状，包括开始的时间、程度和持续时间。动物的定期观察是很必要的，可保证动物不会由于自残、组织自溶或错放造成损耗。试验终结时对全部存活动物实施人道方式处死，观察到濒死动物时应取出实施人道方式处死。观察中和实施人道终点时宜排除死亡动物由于试验样品毒性直接作用的可能性。3. 4 体重在给与样品前即时测量动物体重，接触后头三天每天一次，如试验周期需要时第一次接触后每周一次和试验终结时测量体重。3. 5临床观察急性全身毒性试验观察周期应至少3d，必要时可延长。应进行适当次数的观察并采取相应的措施，使试验动物的损失降至最低，如对发现死亡的动物进行尸检或冷冻，并隔离或处死病弱或濒死的动物。笼边观察宜包括（但不jinxian于此）皮肤与被毛、眼与黏膜的改变，以及呼吸、循环、自主和中枢神经系统、躯体运动神经活动性和行为模式等状况。3. 6 病理学a、临床病理学有临床指征时应考虑进行临床病理学评价，宜进行下列检查：项目包括肝和肾功能，必要时可进行其他临床生化检验，对观察到的作用进行扩展研究。尿液检验不作为常规检验项目，仅在预期或观察到这方面的毒性反应的情况下才考虑进行b、大体病理学如有临床指征应考虑进行大体病理学评价，包括检查体表、体表孔口、头部、胸（腹）腔及内脏等。必要时宜考虑记录脑、肝、肾、肾上腺和攀丸的重量，在取出后尽快称量其湿重，以防止干燥以及由此造成的重量减轻。c、组织病理学典型的急性全身毒性试验不进行动物器官和组织的完全病理学检查，除非有大体病理学明确指征的情况、五、评价指标1、总则在现有试验设计的基础上，采用下列评价指标：a）药典方法试验——在急性全身毒性试验观察期间，如接触试验样品的动物生物学反应不大于介质对照组动物，则试验样品符合试验要求。——采用5只动物，如两只或两只以上出现死亡、或两只或两只以上出现抽搐或俯卧、或3只或3只以上出现体重下降超过10%，则试验样品不符合试验要求。——如试验组动物仅显示轻微生物学反应，而且不多于1只动物出现一般生物学反应症状或死亡，应采用10只动物为试验组重复进行试验。——重复试验时，如全部10只接触试验样品的动物在观察阶段显示没有大于介质对照组动物的科学意义上的生物学反应，则试验样品符合试验要求。b）非药典方法急性全身毒性试验可采用更大范围的方法进行评价，包括临床和解剖病理学检查，这样可以排除重复试验的必要。急性接触试验如出现与平行对照组不确定的差异可进行再评价，宜解释差异性，适宜时再用5只动物扩展试验。六、结果评价对急性全身毒性试验中的发现宜结合以前已有的研究信息进行评价，并分析观察到的毒性作用及大体尸检发现。评价应包括试验物质剂量与发病率和异常症状严重性之间的关系，如行动和临床异常症状、大体损伤、体重变化、致死作用以及其他一般性或特异性作用。